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【文献解读】特异性核定位AR-V7检测对mCRPC用药指导的临床价值研究
    2021-09-13

背景



近年来,在mRNA层面或蛋白层面如何调控AR剪切变异体一直是研究热点。在组织样本中,通常是根据AR-V7蛋白是否属于核定位鉴定AR-V7的状态。而AR-V7核定位无法通过检测mRNA实现。因此,对于AR-V7阳性的鉴定标准,是否需要进行核定位,值得进一步探索。


在本课题组前期研究中,已经验证了CTC AR-V7蛋白检测可以预测ARSi和紫杉烷对患者的疗效。该研究使用基于病理切片的CTC检测方法,可以评估CTC AR-V7蛋白的表达状态及其在CTC中的定位(细胞核或细胞质)。


本研究旨在通过不同的AR-V7阳性鉴定标准,即特异性核定位和非特异性核定位,对比两个标准对患者用药指导的准确性,是否通过放宽CTC AR-V7阳性的鉴定标准,使更多的患者避免接受ARSi治疗导致耐药,而从紫杉烷的治疗中获益。



研究方法



本研究纳入了进展期的mCRPC患者,这些患者即将开始接受新的治疗方案(紫杉烷或ARSi)。每一个疗程后,患者的疗效通过前列腺癌特异性抗原(PSA)表达水平的变化进行评估。在治疗12w后,当患者PSA降低水平≥50%时,则被定义为敏感性患者,否则为耐药性患者。


检测样本为7mL外周血,通过免疫荧光染色对CTC及AR-V7进行鉴定,包括DAPI、CK、CD45、AR-V7。使用两种不同的AR-V7阳性鉴定标准(特异性核定位和非特异性核定位)。当AR-V7在细胞质和细胞核中属于弥漫性表达时,也被定义为非特异性核定位。特异性核定位的标准是只在细胞核内检测到AR-V7非弥散性表达。



研究结果



本次研究共纳入了161mCRPC患者,共采集到191份血样,其中128个样本来自接受ARSi治疗前的患者,63个样本来自接受紫杉烷治疗前的患者。在这些患者中,130例(80.8%)患者采用了单药治疗,30例(18.6%)患者采用了2种药物联合疗法,1例(0.6%)患者采用了3种药物联合疗法。 


对样本中CTC AR-V7进行了检测,细胞核及细胞质定位的CTC AR-V7如图1所示。无论是细胞核定位,还是细胞质定位,AR-V7的检出率都随着接受治疗方案数的增加而升高(图1)。


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图1 不同的CTC AR-V7定位图.(A)CTC AR-V7细胞核定位,(B) CTC AR-V7细胞质定位, (C)表达AR-V7的细胞簇,(D)不同治疗阶段患者CTC AR-V7的阳性率.


特异性核定位AR-V7可更准确预测接受ARSi治疗的患者PSA变化


在128个接受ARSi治疗前的样本中,47例(37%)患者对ARSi治疗显示出敏感性,81例(63%)患者具有耐药性。按照特异性核定位AR-V7阳性的鉴定标准,47例敏感性患者均是AR-V7阴性;在81例耐药性患者中,有16例(20%)患者是AR-V7阳性(图2A)。而按照非特异性核定位AR-V7阳性的鉴定标准,47例敏感性患者中,有6例(13%)患者是AR-V7阳性;81例耐药性患者中,26例(32%)患者是AR-V7阳性(图2B)。而这两种AR-V7阳性鉴定标准对接受紫杉烷治疗的患者治疗结果没有特异性(图2C、D)。


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图2.不同的CTC AR-V7阳性鉴定标准下患者接受治疗后PSA结果统计.(A)特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受ARSi的治疗结果, (B)非特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受ARSi的治疗结果, (C)特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受紫杉烷的治疗结果, (D)非特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受紫杉烷的治疗结果.


特异性核定位AR-V7可更准确预测接受ARSi治疗的患者生存期


对于接受ARSi治疗的患者,无论是特异性核定位(图3A),还是非特异性核定位(图3B) AR-V7阳性的鉴定标准,治疗前AR-V7阳性患者的总生存期短于阴性的患者。不过,当采用特异性核定位的AR-V7阳性鉴定标准时,两者的生存期差距更大(HR 10.4, p<0.0001 vs HR 4.3, p < 0.0001),中位生存期更短(4.6 vs 10.0 m)。而在接受紫杉烷治疗的患者中,无论哪种鉴定标准,AR-V7阳性患者的生存期略短于阴性患者(HR 3.2, p = 0.0005 vs HR 3.2, p = 0.0007)(图2C),中位总生存期基本一致(8.9 vs 9.2 m)(图D)。


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图3. 不同的CTC AR-V7阳性鉴定标准下患者接受治疗后生存期结果统计.(A)特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受ARSi的治疗结果, (B)非特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受ARSi的治疗结果, (C)特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受紫杉烷的治疗结果, (D)非特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准下患者接受紫杉烷的治疗结果.



结论



通过对比两种不同的CTC AR-V7阳性鉴定标准,发现特异性核定位AR-V7阳性鉴定标准能更准确的指导患者的用药。


参考文献:

Howard I. Schera, Ryon P. Grafc, Nicole A. Schreiber,et al. Nuclear-specific AR-V7 Protein Localization is Necessary to Guide Treatment Selection in Metastatic Castration-resistant Prostate Cancer[J]. Eur Urol. 2017 June ; 71(6): 874–882.